Elektroforesis

Elektroforesis adalah teknik pemisahan komponen atau molekul bermuatan berdasarkan perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan listrik. Medan listrik dialirkan pada suatu medium yang mengandung sampel yang akandipisahkan. Teknik ini dapat digunakan dengan memanfaatkan muatan listrik yang ada pada makromolekul. Jika molekul yang bermuatan negatif dilewatkan melalui suatu medium, kemudian dialiri arus listrik dari suatu kutub ke kutub yang berlawanan muatannya maka molekul tersebut akan bergerak dari kutub negatif ke kutub positif. Kecepatan gerak molekul tersebut tergantung pada perbandingan muatan terhadap massanya serta molekulnya. 

Secara umum, elektroforesis dibedakan menjadi dua; yaitu:

1. Elektroforesis kertas adalah jenis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase diam dan partikel bermuatan yang terlarut sebagai fase gerak. Pemisahan ini terjadi akibat adanya gradasi konsentrasi sepanjan gsistem pemisahan. Pergerakan partikel dalam kertas tergantung pada muatan atau valensi zat terlarut, luas penampang, tegangan yang digunakan, konsentrasi elektrolit, kekuatan ion, pH, viskositas, dan adsorpsivitas zat terlarut.
2. Elektroforesis gel ialah elektroforesis yang menggunakan gel sebagai fase diam untuk memisahkan molekul-molekul. Awalnya elektoforesis gel dilakukan dengan medium gel kanji (sebagai fase diam) yang seiring berjalannya waktu elektroforesis gel berkembang dengan menjadikan agarosa dan poliakrilamida sebagai gel media.

Terminologi Pewarisan Sifat 'Mendel'

Ada beberapa istilah yang perlu diketahui untuk menjelaskan prinsip-prinsip pewarisan sifat.  Seperti telah disebutkan di atas, P adalah individu tetua, F₁ adalah keturunan generasi pertama, dan F₂  adalah keturunan generasi ke dua. Selanjutnya, gen D dikatakan sebagai gen atau alel dominan, sedang gen d merupakan gen atau alel resesif. Alel adalah bentuk alternatif suatu gen yang terdapat pada lokus (tempat) tertentu.  Gen D dikatakan dominan terhadap gen d, karena ekpresi gen D akan menutupi ekspresi gen d jika keduanya terdapat bersama-sama dalam satu individu (Dd). Dengan demikian, gen dominan adalah gen yang ekspresinya menutupi ekspresi alelnya. Sebaliknya, gen resesif adalah gen yang ekspresinya ditutupi oleh ekspresi alelnya.

Individu Dd dinamakan individu heterozigot, sedang individu DD dan dd masing-masing disebut sebagai individu homozigot dominan dan homozigot resesif. Sifat-sifat yang dapat langsung diamati pada individu-individu tersebut, yakni tinggi atau pendek, dinamakan fenotipe.  Jadi, fenotipe adalah ekspresi gen yang langsung dapat diamati sebagai suatu sifat pada suatu individu. Sementara itu, susunan genetik yang mendasari pemunculan suatu sifat dinamakan genotipe.  Pada contoh tersebut di atas, fenotipe tinggi (D-) dapat dihasilkan dari genotipe DD atau Dd, sedang fenotipe pendek (dd) hanya dihasilkan dari genotipe dd.  Nampak bahwa pada individu homozigot resesif, lambang untuk fenotipe sama dengan lambang untuk genotipe.   .

Sterilisasi (Mikrobiologi)

Sterilisasi merupakan suatu proses untuk mematikan semua organisme yang teradapat pada suatu benda. Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi 3 macam, yaitu penggunaan panas (pemijaran dan udara panas); penyaringan; penggunaan bahan kimia (etilena oksida, asam perasetat, formaldehida dan glutaraldehida alkalin).

(Hadioetomo, 1993)

Metode yang digunakan dalam sterilisasi ada beberapa macam antar lain:

• Metode pemanasan, metode yang sangat sering digunakan, karena dalam metode ini dapat membunuh bakteri dengan menggunakan pemanasan dengan suhu di atas 100?C, bukan hanya bakteri saja yang terbunuh tetapi spora juga dapat terbunuh.

• Metode ionizing irradiation, metode dengan menggunakan radiasi dari ß dan metode ini biasa digunakan untuk mensterilkan jarum, latex catheters dan surgical gloves.

• Metode filtrasi merupakan metode yang digunakan untuk memindahkan atau memisahkan bakteria, sehingga didapatkan suatu cairan yang lebih murni. Metode filtrasi ini digunakan untuk bahan-bahan yang tidak tahan terhadap pemanasan seperti media dan serum.

• Metode kimia, digunakan dengan cara memberikan cairan disinfektan. Macam-macam senyawa kimia yang digunakan untuk sterilisasi adalah alkohol 70%, formalin 4%, fenol dan detergen 

(Greenwood, 2002).

Teknik Aseptis

Salah satu teknik dasar dalam analisa mikrobiologi adalah teknik transfer aseptis (suatu metode atau teknik di dalam memindahkan atau mentransfer kultur bakteria dari satu tempat ke tempat lain secara aseptis agar tidak terjadi kontaminasi oleh mikroba lain ke dalam kultur). Teknik ini sangat esensial dan kunci keberhasilan prosedur mikrobial yang harus diketahui oleh seorang yang hendak melakukan analisis mikrobiologi. Pengambilan sampel harus dilakukan secara statistik agar tidak bias, jadi secara acak (random sampling). Selain itu, digunakan teknik aseptis selama pengambilan sampel agar tidak terjadi pencemaran. Alat-alat yang digunakan harus steril. Bahan makanan cair diambil dengan pipet steril, makanan padat menggunakan pisau, garpu, sendok atau penjepit yang steril (Afrianti, 2004).

Teknik aseptis sangat penting dalam pengerjaan mikrobiologi yang memerlukan ketelitian dan keakuratan disamping kesterilan yang harus selalu dijaga agar terbebas dari kontaminan yang dapat mencemari. Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat besar dan komplek. Beratus-ratus spesies berbagai mikroba biasanya menghuni bermacam-macam bagian tubuh kita, termasuk mulut, saluran pencernaan, dan kulit. Sekali bersin terdapat beribu-ribu mikroorganisme sehingga diperlukan teknik yang dapat meminimalisirnya seperti pengisolasian (Pelczar & Chan, 1986).

Teknik aseptis merupakan teknik yang digunakan untuk menghindarkan atau mengurangi keberadaan dari kontaminan. Teknik aseptis itu antara lain:

• Disinfeksi area kerja, meja disemprot dengan alkohol 70%, kemudian dilap dengan tissue. Tangan juga disemprot dengan alkohol 70%, untuk menghindarkan dari adanya kontaminasi.

• Mulut tabung/ erlenmeyer, sterilisasi mulut tabung/ erlenmeyer dilakukan dengan membuka tutup tabung dan dilewatkan pada api, setelah itu menutup kembali dengan kapas.

• Cawan petri, cawan petri sebelum digunakan terlebih dahulu harus dilewatkan ke api bunsen, harus didekatkan ke api bunsen agar tidak terjadi kontaminasi.

(Benson, 2002)